操作台 02 · 构建基因表达载体

不是“放进去”就够了:目的基因要装进一份能工作的载体

一段目的基因要在受体细胞中表达,既要进入合适的位置,也要保留让它被复制、被筛选、被转录的必要元件。按下列步骤推进,观察载体图如何从闭合的质粒变成重组表达载体。

按顺序放入操作步骤

每次只可选择当前下一步。若顺序不对,实验台会说明卡在哪里。

    先找到目的基因和质粒载体。接下来,从列表中选择第一步。
    限制酶切点
    目的基因片段
    复制原点标记基因启动子限制酶切割位点
    起点:完整质粒载体

    图中展示的是表达载体的常见思路:复制原点有利于载体在受体中复制;标记基因帮助筛选;启动子位于目的基因前方,参与转录起始。并非所有只用于克隆的载体都一定要有启动子。