双缩脲反应
先加入 NaOH，再滴加少量 CuSO₄，无需加热。在碱性条件下，Cu²⁺ 与两个或更多肽键形成紫色配合物。
蛋白质溶液
NaOH & CuSO₄
观察：淡白色蛋白质溶液。
结论：尚无显色证据。
第 9 章 · 蛋白质实验室
折叠，展开，显色
蛋白质的功能依赖特定空间结构。选择一种处理条件，观察构象变化；再用两类颜色反应判断样品中留下了什么化学线索。
构象与功能变性条件鉴别反应
01
构象实验：什么让蛋白质失活？
变性主要是高级结构被破坏，通常不是肽键断裂。请改变处理条件。
天然构象：功能位点匹配
内部作用力维持折叠，酶活性或特异结合得以实现。
内部作用力维持折叠，酶活性或特异结合得以实现。
向蛋白质溶液施加条件
每次用一份新样品比较；恢复对照表示重新取样，不是使变性蛋白自动复性。
对照：蛋白质保持特定空间构象，通常保留原有生物活性。
02
颜色反应：用反应位点作证据
先加入试剂，再读取试管颜色与结论。这里的“蛋白质”以鸡蛋清溶液为例。
黄色反应
浓硝酸使蛋白质中部分可被硝化的芳香族氨基酸残基发生反应，蛋白质可呈黄色（加碱后颜色加深）。
蛋白质溶液
浓 HNO₃
观察：淡白色蛋白质溶液。
结论：尚未检验芳香族氨基酸残基。
快速判别
一份蛋白质溶液先被加热至变性，再做双缩脲反应。最合理的预测是？
选择一项，依据“变性改变的是什么”作答。
学习提示：把“结构变化”和“化学键是否断裂”分开判断，能避免大部分蛋白质实验题的混淆。