吸光光度分析 · 读数之前先检查曲线
标准曲线质量检查台
一支未知溶液放进比色皿,仪器给出一个吸光度。数字看起来很确定,但它究竟能不能换算成浓度,取决于你有没有把空白、标准点和未知样品放在同一把“尺子”上。
先别急着报浓度
未知样品的吸光度落在标准点之间,就可以内插;落在标准范围外,为什么不能顺手把直线延长?先用下面这组测量记录自己作出判断。
校准图
标准点拟合直线未知样品
标准曲线及未知样品定位图
把“原始读数”拆开看
每个标准溶液先扣除空白吸光度,再进入拟合。残差 = 实测校正吸光度 − 拟合值;它告诉你点有没有系统地偏离直线。
| 溶液 | 浓度 c mg/L | 原始 A | 校正后 A′ | 拟合 A′ | 残差 |
|---|
空白不是“多测一次”
空白溶液带着试剂、溶剂、比色皿和仪器基线的背景信号。把它从每次读数中扣掉,才是在比较待测组分真正带来的吸收。
- 空白应稳定且足够低;异常先查试剂污染、比色皿指纹或调零。
- 未知样品的 A′ 要被最低、最高标准点夹住,才是内插。
- r 很高仍要看残差是否有方向性,也要看样品是否处在曲线适用范围内。
小挑战:这次该怎么做?
未知样品原始吸光度为 0.675,而本批最高标准的原始吸光度是 0.491。在已经确认仪器工作正常的前提下,哪种处理最妥当?